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微生物菌群的选择与培养
针对所学的关于水污染治理的有关理念，加之对环境微生物这门课程的理解，此次环境微生物这门课程的设计我选用的微生物菌群是对保健、水产、养殖、种植甚至环保等方面都有益的菌群。
一、有益微生物的概念（“EM”菌群）
“EM”是英语Effective和microorganisms的缩写，意为有益微生物群，是日本琉球大学的比嘉夫教授于1983年研制成功的微生物工程技术中综合性最强的新创造。有益微生物群由整个生态系统都存在的五大类微生物（光合细菌、乳酸菌、放线菌、酵母菌、发酵型丝状菌）中的多种有益微生物组成。
这些微生物组合在一个统一体中互相促进，共同组成一个复杂而稳定的具有多元功能的微生物生态系统，在水族箱使用后，可抑制有害微生物，特别是病原菌和腐败菌的活动，从而改善水质，并改善鱼类消化道细菌群落，促进鱼类健康快速生长。其功能要超过硝化细菌和光合细菌。
二、有益微生物群的主要成分
1、光合菌群（好氧型和厌氧型） 如光合细菌和蓝藻类。属于独立营养微生物，菌体本身含60％以上的蛋白质，且富含多种维生素，还含有辅酶Ｑ10、抗病毒物质和促生长因子；它以土壤接受的光和热为能源，将土壤中的硫氢和碳氢化合物中的氢分离出来，变有害物质为无害物质，并以植物根部的分泌物、土壤中的有机物、有害气体（硫化氢等）及二氧化碳、氮等为基质，合成糖类、氨基酸类、维生素类、氮素化合物、抗病毒物质和生理活性物质等，是肥沃土壤和促进动植物生长的主要力量。光合菌群的代谢物质可以被植物直接吸收，还可以成为其它微生物繁殖的养分。
2、乳酸菌群（厌氧型） 以嗜酸乳杆菌为主导。它靠摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类形成乳酸。乳酸具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动和有机物的急剧腐败分解。乳酸菌能够分解在常态下不易分解的木质素和纤维素，并使有机物发酵分解。乳酸菌还能够抑制连作障碍产生的致病菌增殖。
3、酵母菌群（好氧型） 它利用植物根部产生的分泌物、光合菌合成的氨基酸、糖类及其它有机物质产生发酵力，合成促进根系生长及细胞分裂的活性化物质。酵母菌在有益微生物群中对于促进其它有效微生物（如乳酸菌、放线菌）增殖所需要的基质（食物）提供重要的给养保障。此外，酵母菌产生的单细胞蛋白是动物不可缺少的养分。
4、革兰氏阳性放线菌群（好氧型） 它从光合细菌中获取氨基酸、氮素等作为基质，产生出各种抗生物质、维生素及酶，可以直接抑制病原菌。它提前获取有害霉菌和细菌增殖所需要的基质，从而抑制它们的增殖，并创造出其它有益微生物增殖的生存环境。放线菌和光合细菌混合后的净菌作用比放线菌单兵作战的杀伤力要大得多。它对难分解的物质，如木质素、纤维素、甲壳素等具有降解作用，并容易被动植物吸收，增强动植物对各种病害的抵抗力和免疫力。放线菌也会促进固氮菌和VA菌根菌增殖。
5、发酵系的丝状菌群（厌氧型） 以发酵酒精时使用的曲霉菌属为主体，它能和其他微生物共存，尤其对土壤中酯的生成有良好效果。因为酒精生成力强，能防止蛆和其他害虫的发生，并可以消除恶臭。
三、“EM”菌群的培育
1、配方
配方一：100公斤干净的水、EM菌种5公斤、红糖5公斤、尿素0.6公斤、磷酸二氢钾200克、维生素C50克；
配方二：100公斤干净的水、EM菌种3公斤、光合细菌2公斤、红糖4公斤、尿素0.4公斤、磷酸二氢钾150克、维生素C50克（此配方不需要长期使用，3个月使用一次即可，平常建议采用配方一）。
2、材料选择
a、塑料桶：选择容量在20公斤以上的塑料桶（卫生条件要求塑料桶能容装饮用水的标准）；
b、红糖：商品名叫赤砂糖，也可用糖蜜代替；
c、EM菌种：如果你现在想采用新方法培育，建议从实验场引进新菌种，如果你是引进的新菌种，半年内可不需要添加光合细菌；
d、光合细菌：耐低酸度的光合菌，一般光合细菌适合生存在PH值5-8的范围；
e、磷酸二氢钾：纯度在90%以上的，不可用肥料用的磷酸二氢钾代替； f、D-异抗坏血酸：为抗氧化剂，也叫维生素C，是一种食品添加剂，不可用药品的维生素C代替，它能延长EM的保质期、提高动植物的抗疾病能力等作用；
g、尿素：化肥用的即可；
h、水：干净的水，能够饮用的水，自来水需要放置2天以上才能使用，冷开水或纯净水最好。
3、培育方法
把水放入塑料桶中加入红糖→加入EM菌种和光合细菌→尿素和磷酸二氢钾分别溶化后加入→摇均→密封→光照下培育，温度保持在25-35度→每天摇动两次，每次透气半小时→第三天加入D-异抗坏血酸，摇均→第四天停止光照，检测PH值，达到3.8以下培育完成，未达到继续培育→开盖透气，三天后完成培育，密封保存或使用。如果温度偏低、光照不足，培育时间肯定会延长，还有可能造成失败，使用效果也有影响。是否培育完成凭PH测试纸测试PH值在3.8以上即合格。培育中是否有悬浮物产生都是正常情况，一般温度高悬浮物容易产生。如果培育温度偏低，培育的EM气体将减少。培育中有异味是很正常的，PH合格后再透气两天如果异味还很严重，就有可能培育失败了。冬季温度偏低小批量培育可做一个较大点的纸箱或木箱，把培育桶放在箱中，几个桶的中间吊一个60W的灯泡，封好箱盖，即可保证光和温度了，但要注意防火安全。
附录： 有益微生物群在环保业的具体用法
一、机理与作用
利用微生物治理污水和城市生活垃圾是今后环保产业的主攻方向。作用机理是以光合菌群和酵母菌群为主导，协同其它有益微生物共同作用，产生抗氧化物质，通过氧化还原发酵等途径，分解氧化有机物，把有害有毒转化为无害无毒，变有害为有用。在厕所去臭、生活垃圾利用、生活和工业废水治理等环保领域，应用前景广阔且成本低廉。
二、处理方法
目前常用有益微生物群治理环境的方法是用有益微生物群稀释液喷布及有益微生物群发酵料的撒放，采取三级净化槽法、生物膜法、水面喷施法、垃圾发酵法等。
1．三级净化槽法
循环处理反应系统一般是设置净化槽。净化槽由三个大槽组成，排出的污水先贮入第一槽，由有益微生物群微生物进行分解，第二个槽污水中的有机物分解成水和ＣＯ2 （二氧化碳），第三个槽将处理过的水再送回最前面的处理槽，如此循环，可增加有益微生物的密度，提高水的抗氧化力。投放比例：第一净化槽按污水接受量的千分之一投入 ，第二及第三个槽均按水量的万分之一投入（ 可依据水质调整倍率）。每周投入一次。
2．生物膜法
为使有益微生物群微生物在水底滞留繁殖，可用多孔砖石、木炭、竹炭、沸石等在10-50倍有益微生物群稀释液中浸泡2 － 4 天后，抛入污水和放置于出水口。10天换一次。净化有一定流速的水域时，如河床没有淤泥，应投置不会冲走的特制水泥块作为生物膜。
3．水面喷施法
按总水量100000∶1 的比例取有益微生物群（ 加等量红糖 ），配制100 倍有益微生物群稀释液，密封发酵12小时后，泼洒水面。河流湖泊净化时，水能保持流动状态更好。
4．有益微生物群处理垃圾
（1）有益微生物群提高垃圾处理能力
在垃圾堆埋过程中，如以有益微生物群喷洒处理，可以有效地解决上述的问题，方式包括在垃圾收集时喷或当垃圾运输到垃圾场时喷，两者兼用效果更佳，有益微生物群对垃圾的主要作用有以下几方面：
a.加速垃圾的发酵分解，在短时间内减少堆积垃圾的体积，变相增加总垃圾堆埋量的数目。
b.抑制腐败细菌的生长，改善有机物的分解途径，减少氨和琉化氢的释放量和氨类物质的产生，同时亦减少沼气量。
c.由于有效微生物作用会消耗水份，从而减少污水产生的数量，也改善了污水的水质，减低污染成份，方便将来污水的处理。
d.抑制蚊蝇的蛹、蛆孵化，达到减少蚊蝇孳生的长远效果，减少疾病。 e.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的产生。
f.促进堆填区土壤化和再生的过程。
（2）有益微生物群垃圾处理技术
在开始处理的前3个月，按每天进场200吨垃圾计算，每天向垃圾喷洒1吨的
有益微生物群稀释液 ，如果垃圾场内有排沼气管道，可用有益微生物群稀释液灌入垃圾底层以增加处理效果，以后按处理进度而定，每天按垃圾数量及垃圾质素而定 ，向新到垃圾喷洒0.3—0.5吨的10%有益微生物群稀释液 ，若要增加灭蚊蝇效果，有益微生物群稀释液中可加入约0.5—1%按叶，冬青或其它植物提取剂，以增加对成虫的杀灭效果，此种提取物对人畜无害 ，绝对合乎环保和卫生要求（以上处理为100倍有益微生物群稀释液）。
（3）使用有益微生物群处理垃圾场后的效果
a.7—10天内垃圾场的旧垃圾臭味会明显减少甚至消失，新到垃圾如在垃圾收集站进行有益微生物群处理，臭味亦会明显降低。
b.苍蝇捕集率会于7天后开始减少，配合植物提取剂60%以上。
c.沼气产生量会于30天内明显减少 ，长期使用沼气量可减少40%以上。 d.垃圾渗滤液排出量会卡30天内开始减少 ，COD及BOD 值稳定下降，数值视垃圾场使用年龄及垃圾性质而定。
（4）综合效益分析
a.减少垃圾污水产生量，改善污水的水质，减低将来污水的处理费用。 b.加速垃圾分解，减少体积，增加总垃圾堆埋量而减少垃圾处理成本。 c.减少臭气释放量，减少蚊蝇，提高人员的健康和工作效率。
d.减少沼气，避免因沼气意外而造成的经济和生命损失。
e.减少污水产生的数量 ，改善了污水水质 ，减低垃圾污水的污染。 f.加速垃圾分解，减少垃圾的体积，促进堆填区土壤化和再生的过程。 g.抑制腐败细菌的生长，降低沼气，氨和琉化氢的产生，减低大气污染。 h.抑制蚊虫的蛹孵化，长远达到减少蚊蝇和疾病的效果。
i.减少杀虫剂的使用。
j.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的产生。
实习心得
通过这次为期一个星期的环境微生物课程设计，不仅让我从各方面了解了微生物的类型及培养方式，还让我认识到微生物的不同菌群对我们水利类专业的贡献。
首先，本次微生物的实习，让我对于书本上的知识有了全面的认识，微生物不仅在微生物学上很重要，它还和我们的生活息息相关，就我这次所选用的“EM”菌群而言，它广泛运用于养殖和生活用水、城市垃圾的处理等各方面；其次，也让我明白不能单方面从书本来浅显的理解微生物，微生物不是分类学上的名词，而是囊括了细菌、真菌、病毒等一大类生物群体，我们不仅要了解各类型微生物的结构、繁殖、培育等，还要了解它的生活习性以及对环境的利弊；最后，综合对微生物各方面的了解，我们还要把有益于人类的各种微生物群充分运用于生活中。
在这次课程设计中，我也发现了很多连我自己也弄不明白的盲点，除了运用老师教导的知识外，我也查看了各类书籍及资料，已达到更近一步了解微生物的目的。就拿微生物菌群的培养来说，不同类型的微生物培养基选用的营养物质也有差异，还有外在环境条件对微生物菌群的影响等等，我们必需要综合各方面考量，使微生物培育达到更好的效果。
总的来说，这次实习不仅完善了我对书本上知识的学习，达到了学以致用的作用，还更好的来发现了自己的不足，从而加以弥补，也让我了解到微生物学的重要性。
第一章 医学微生物学概述
一、单项选择题
1．属于非细胞型微生物的是 C
A．立克次体 B.衣原体 C.病毒 D.支原体
2．真核细胞型微生物是指 B
A．细菌 B.真菌 C.放线菌 D.螺旋体
3．下列人体各部位中，正常情况下无微生物寄居的是 D
A．皮肤 B.消化道 C.呼吸道 D.颅腔
4．关于微生物的作用叙述错误的是 D
A．参与自然界物质循环 B.能制造出大量的人类必需品
C．能引起人类疾病 D.以上都不是
5．学习医学微生物学的目的主要是 A
A．为了保障人民群众的健康 B.为了发展更多的有益微生物
C．为了完成教学任务 D.为了考出高分让家长高兴
6. 不属于原核细胞型的微生物是 B
A．细菌 B.病毒 C.支原体 D.立克次体 E.衣原体
二．填空题
1．微生物按其结构、组成等差异，分为 非细胞型微生物 、原核细胞型微生物 和 真核细胞型微生物 -三大类。
2．引起人类感染或传染病的微生物有 非细胞型微生物 和 原核细胞型微生物 两类。
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三．名词解释
1．微生物 2.病原微生物
微生物 ：是存在于自然界的一群个体微小，结构简单，肉眼看不见，必须借助显微镜或电子显微镜放大后才能观察到得微小生物
病原微生物：具有致病性的微生物
四．是非题
1． 正常情况下，人类实质器官和密闭腔道中无菌。
2． 英国人琴纳创用牛痘苗接种以预防天花，故琴纳是预防医学的奠基人。
五．简答题
1． 列出微生物的分类，并说明各类微生物的结构特点。
非细胞型微生物 ：体积小
原核细胞型微生物 ：无核膜和核仁
真核细胞型微生物 ：有典型的核膜和核仁【直肠粘膜微生物菌群的丰都差异表现出很强的疾病关联性。】
一．单项选择题
1．敷料的消毒灭菌常用 C
A．煮沸法 B.流通蒸汽法 C.高压蒸汽灭菌法 D.照射法
2．利用干烤灭菌的最适温度和时间为 A
A．160~170℃2小时 B.100℃30分钟 C.121.3℃15分钟 D.80~100℃2小时
3．消毒的含意是指 B
A．杀死物体上所有微生物的方法 B.杀死病原微生物的方法 C.杀死芽胞的方法 D.抑制微生物生长繁殖的方法
4．杀灭芽胞最常用而有效的方法是 C
A．煮沸分钟 B.紫外线照射 C.高压蒸汽灭菌 D.干烤灭菌
5．煮沸100℃5分钟的效果或用途是 D
A．杀死细菌芽胞 B. 适用于外科器械的灭菌
C. 医院常用的消毒灭菌方法 D. 作为饮水与食具的消毒
6．常用高压蒸汽灭菌法的特点是 A
A．温度升高至121.3℃ B.压力为大气压
C. 原理与家用高压锅不同 D.利用干热灭菌
7．实验室常以干热灭菌法灭菌的器材是 B
A．注射器 B.玻璃器皿 C.手术刀、剪 D.橡皮手套
8. 紫外线杀菌的原理是 C
A．破坏细菌细胞壁肽聚糖的合成纤维 B. 使蛋白质变性
C. 损坏DNA构型 D. 影响细胞膜的通透性
9. 影响消毒剂作用的因素中，不重要的是 B
A．消毒剂的性质、浓度和作用时间 B. 微生物种类、数量和生活状态
C. 外界有机物的存在 D. 盐的存在
10. 杀菌力最强的酒精浓度为 B
A．50%~60% B.70%~75% C.80%~85% D.90%~95%
11．体温表常用的消毒剂为 B
A．碘酒 B.酒精 C.红汞 D.来苏儿
12．可用于排泄物消毒的消毒剂为 A
A．石碳酸 B.碘酒 C.龙胆紫 D.过氧化氢
13. 正常菌群是指 A
A．对人体不致病的细菌 B.存在于正常人体内的细菌 C.存在于人体体表的细菌 D.以上都不对
14. 正常菌群通常对人体没有 C
A．营养作用 B.生物拮抗作用 C.致病作用 D.抗原刺激作用
15. 引起条件致病菌感染的原因不包括 C
A．正常菌群侵入非正常寄居部位 B.机体防御功能下降 C.含氮饮食增加 D.菌群失调
16. 下列拿一种情况下易发生菌群失调 A
A．长期使用广谱抗生素 B.长期使用抗毒素 C.长期服用维生素 D.长期使用干扰素
二．填空题
1． 高压蒸汽灭菌法为最常选用的灭菌法，通常在_103.4KPA______压力下，维持15-20__分钟可杀死细菌的所有繁殖体与芽胞。
2． 湿热的杀菌效果比干热好的原因是 湿热时细菌吸收水分使蛋白质易凝固_________、湿热比干热穿透力强___________和_湿热的蒸汽与物体接触凝结成水时放出潜热，可迅速提高被灭菌物体的温度_________。
3． 紫外线的杀菌原理为_破坏DNA结构___________，但紫外线的穿透力弱_____，故只能用于手术室。传染病房______和_无菌室_______的消毒。
三．名词解释
1．消毒 2.灭菌 3.无菌与无菌操作 4.防腐 5.条件致病菌 6.机会性感染
四．是非题
1．手术刀剪宜用高压蒸汽法灭菌
2．牛奶、酒类的消毒常用巴氏消毒法。 A
3．不耐高温的营养物质常用间歇灭菌法灭菌。A
4．制备无菌生理盐水可用干烤法灭菌。B
5．细菌种类和所处环境不同，抗干燥能力不同。
6．又深又窄、污染严重的伤口，需用3%过氧化氢溶液冲洗。
五．简答题
本文来源：http://www.gbppp.com/sh/261058/
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